第三节　草菇菌种的选择和制作

一、菌种的选择和优质菌种的标准

1．菌种的选择

草菇品种较多，各地可根据生产实际，选用适于本地栽培、发菌出菇及转潮快、抗逆性强、优质、高产、商品性好，以及经省级以上农作物品种审定委员会登记的品种。应从具有相应资质的供种单位引种，通过小面积试种后，再进行大面积生产，避免盲目引进新品种，一次性投入过多产生经济损失。在选购草菇菌种时若发现袋内菌丝已萎缩，出现水渍状液体，有腥臭味者不能使用。袋内菌丝过分浓密、洁白，或出现鱼卵状颗粒，也可能是混有杂菌，应淘汰。

2．优质菌种的标准

（1）母种 优质母种为菌丝淡白色至黄白色、半透明、健壮、爬壁能力强，气生菌丝旺盛，菌种表面允许有少量红褐色的厚垣孢子。在32℃的条件下，5天长满斜面。

（2）原种及栽培种 要求生活力强，菌丝生长旺盛、分布均匀，菌丝灰白有光泽，吃料快，不带病、虫螨和杂菌，无异味，无老化、退化及菌料干缩离壁现象；有草菇特有的清香味，无酸、臭、霉等异味。在30～32℃，菌种瓶、袋约20天即可发满。

二、菌种制作

根据生产需要，草菇菌种要提前适时分批制备。一般在开始栽培前20天安排生产栽培种，在生产栽培种前20天生产原种，在生产原种前10天购买或生产母种。菌种生产时间非常重要，一定要按照菌种生产计划严格执行。

1．菌种分离

草菇菌种分离可采用组织分离法和孢子分离法，下面介绍组织分离法。选取新鲜、健壮蛋形期子实体，用75%的酒精棉球进行表面消毒，再用无菌水冲洗2～3次，并用无菌纱布擦干后用手术刀把种菇纵剖为两半，在菌盖和菌柄连接处用手术刀切成5mm2厚3mm的组织块接于培养基上，盖好平皿，置于32℃的恒温培养箱中暗光培养。待菌落长到2cm，选取菌丝洁白、细密、光滑，沿培养基平行生长的菌落，挑取菌落尖端的菌丝于试管PDA斜面上对菌种进行纯化培养。选择生长速度快、菌丝健壮的菌株为第一代母种（图2-10）。

2．菌种的制作

（1）母种的制作

① 配方。马铃薯200g、葡萄糖20g、蛋白胨3g、琼脂18～20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g，水1000ml，pH7.5～8.0。

② 按常规制备、灭菌、接种后在32℃的恒温条件下培养5天，菌丝长满试管斜面。草菇母种经一段时间培养后，其白色气生菌丝会发黄并产生红褐色的厚垣孢子，这是正常现象。

（2）原种、栽培种的制作

① 配方

原种配方：麦粒98%、石灰粉1%、石膏粉1%，含水量50%±2%，pH8.0～9.0。

栽培种配方：棉籽壳80%、麸皮15%、生石灰5%，含水量60%±2%，pH8.0～9.0。

② 菌种瓶、袋的选择。原种常用750ml的标准菌种瓶（图2-11），栽培种一般选用15cm长、28cm宽、0.004cm厚的聚丙烯袋（图2-12）。

③ 拌料、装瓶（袋）、灭菌、冷却

a．拌料：按常规方法将料水混拌均匀。

b．装瓶（袋）：按常规方法装瓶（袋），装好料后使用棉塞或盖上能满足滤菌和透气要求的无棉盖体。750ml菌种瓶，一般装培养料湿重约为400g。规格为宽15cm、长28cm、厚0.004cm厚的聚丙烯袋，每袋装料湿重约为600g。

c．灭菌、冷却：装瓶（袋）后及时灭菌，高压灭菌1.5MPa维持2h（麦粒培养基），常压灭菌100℃条件下10h（棉籽皮培养基）。灭菌后的培养瓶在冷却时，注意要缓慢排气进行降温，待灭菌罐内温度降至60℃，再移至冷却室彻底降温。

d．接种：在无菌条件下接种，每支试管母种接种5瓶（袋）原种，每瓶原种接种30袋栽培种。

④ 培养。培养室要求清洁、干燥、凉爽。室内温度保持30～32℃，室内空气相对湿度40%～50%，室内空气新鲜，暗光培养。在培育期间，要经常检查菌瓶有无杂菌感染，一旦发现杂菌要及时淘汰。原种、栽培种一般培育20天即可长满。

（3）菌种贮存 草菇成品母种放置于室温15～20℃避光保存，控制传代次数在3代以内；成品原种和栽培种可存放于清洁、干燥、避光处贮存，在28～32℃贮存不要超过5天，而在15～20℃贮存不要超过15天，应及时使用。